微生物實驗室都需要些什么

（一）高壓蒸汽滅菌鍋（High-PressureSteam Sterilization Pot）

高壓蒸汽滅菌鍋是一個密閉的、可以耐受一定壓力的雙層金屬鍋。鍋底或夾層內(nèi)盛水，當水在鍋內(nèi)沸騰時由于蒸汽不能逸出，使鍋內(nèi)壓力逐漸升高，水的沸點和溫度可隨之升高，從而達到高溫滅菌的目的。一般在0.11MPa的壓力下，121℃滅菌20~30min，包括芽孢在內(nèi)的所有微生物均可被殺死。如果滅菌物品體積較大，蒸汽穿透困難，可以適當提高蒸汽壓力或延長滅菌時間。

高壓滅菌鍋有臥式、立式、手提式等多種類型，在微生物學(xué)實驗室，常用的是手提式和立式高壓蒸汽滅菌鍋。和常壓滅菌鍋相比，高壓滅菌鍋的優(yōu)點是滅菌所需的時間短、節(jié)約燃料、滅菌*等。其缺點是價格昂貴，滅菌容量較小。




（二）凈化工作臺(Clean Bench)

凈化工作臺是一種局部層流裝置，能在局部形成高潔度的工作環(huán)境。它由工作臺、過濾器、風(fēng)機、靜壓箱和支撐體等組成，采用過濾空氣使工作臺操作區(qū)達到凈化除菌的目的。室內(nèi)空氣經(jīng)預(yù)過濾器和高效過濾除塵后以垂直或水平層流狀態(tài)通過工作臺的操作區(qū)，由于空氣沒有渦流，所以，任何一點灰塵或附著在灰塵上的雜菌都能被排除，不易向別處擴散和轉(zhuǎn)移。因此，可使操作區(qū)保持無菌狀態(tài)。

與無菌室和接種箱比較，使用凈化工作臺具有工作條件好、操作方便、無菌效果可靠、無消毒-藥劑對人體危害、占用面積小且可移動等優(yōu)點。如果放在無菌室內(nèi)使用，無菌效果更好。其缺點是價格昂貴，預(yù)過濾器和高效過濾器還需要定期清洗和更換。






（三）培養(yǎng)箱（CultureBox）

培養(yǎng)箱是培養(yǎng)微生物的設(shè)備。制熱式培養(yǎng)箱是由電爐絲和溫度控制儀合成的固定體積的恒溫培養(yǎng)裝置，大小規(guī)格不一。微生物實驗室常用的培養(yǎng)箱工作容積有450×450×350mm3或650×500×500mm3，適用于室溫至60℃之間的各類微生物培養(yǎng)。目前，隨著科學(xué)水平的發(fā)展，培養(yǎng)箱設(shè)備的完善程度和價格有很大差別。有各種結(jié)構(gòu)合理、功能齊全的培養(yǎng)箱，如恒溫培養(yǎng)箱、恒溫恒濕培養(yǎng)箱、低溫培養(yǎng)箱、微生物多用培養(yǎng)箱和二氧化碳培養(yǎng)箱等。有的用計算機控制，可選擇多條時間線變換溫差，從而克服了環(huán)境溫度的影響，一年四季均能達到培養(yǎng)要求的溫度。





（四）干燥箱（Drying Box）

干燥箱是用于除去潮濕物料內(nèi)及器皿內(nèi)外水分或其它揮發(fā)性溶液的設(shè)備。類型很多，有箱式、滾筒式、套間式、回轉(zhuǎn)式等。微生物學(xué)實驗室多用箱式干燥箱，大小規(guī)格不一。工作室內(nèi)配有可活動的鐵絲網(wǎng)板，便于放置被干燥的物品。制熱升溫式干燥箱也是有電爐絲和溫度控制儀組成，可調(diào)節(jié)溫度從室溫至300℃任意選擇。有的干燥箱采用導(dǎo)電溫度計為敏感元件，配合晶體管和繼電器組成自動控制系統(tǒng)，克服了金屬管型熱膨脹控制的缺點。此外，還有真空干燥箱(配有真空泵和氣壓表)，可在常壓或減壓下操作。





（五）搖床（Shaking Bed）

搖床又稱搖瓶機，它是培養(yǎng)好氣性微生物的小型試驗設(shè)備或作為種子擴大培養(yǎng)之用，常用的搖床有往復(fù)式和旋轉(zhuǎn)式兩種。往復(fù)式搖床的往復(fù)頻率一般在80~140次/min，沖程一般為5~14cm，如頻率過快、沖程過大或瓶內(nèi)液體裝量過多，在搖動時液體會濺到包扎瓶口的紗布或棉塞上，導(dǎo)致雜菌污染，特別是啟動時更容易發(fā)生這種情況。旋轉(zhuǎn)式搖床的偏心距一般在3~6cm之間，旋轉(zhuǎn)次數(shù)為60~300rpm。

放在搖床上的培養(yǎng)瓶（一般為三角瓶）中的發(fā)酵液所需要的氧是由空氣經(jīng)瓶口包扎的紗布(一般8層)或棉塞通入的，所以氧的傳遞與瓶口的大小、瓶口的幾何形狀、棉塞或紗布的厚度和密度有關(guān)。在通常情況下，搖瓶的氧吸收系數(shù)取決于搖床的特性和三角瓶的裝樣量。

往復(fù)式搖床是利用曲柄原理帶動搖床作往復(fù)運動，機身為鐵制或木制的長方框子，有一層至三層托盤，托盤上有圓孔備放培養(yǎng)瓶，孔中凸出一個三角形橡皮，用以固定培養(yǎng)瓶并減少瓶的振動，傳動機構(gòu)一般采用二級皮帶輪減速，調(diào)換調(diào)速皮帶輪可改變往復(fù)頻率。偏心輪上開有不同的偏心孔，以便調(diào)節(jié)偏心距。往復(fù)式搖床的頻率和偏心距的大小對氧的吸收有明顯的影響。

旋轉(zhuǎn)式搖床是利用旋轉(zhuǎn)的偏心軸使托盤擺動，托盤有一層或兩層，可用不銹鋼板、鋁板或木制板制造。在三個偏心軸上裝有螺栓可調(diào)節(jié)上下，使托盤保持水平。這種搖床結(jié)構(gòu)復(fù)雜，造價高。其優(yōu)點是氧的傳遞較好、功率消耗小、培養(yǎng)基不會濺到瓶口的紗布上。





（六）顯微鏡（Microscope）

微生物個體微小，必須借助顯微鏡才能觀察清楚它們的個體形態(tài)和細胞結(jié)構(gòu)。因此，在微生物學(xué)的各項研究中，顯微鏡就成為*的工具。

顯微鏡的種類很多，根據(jù)其結(jié)構(gòu)，可以分為光學(xué)顯微鏡和非光學(xué)顯微鏡兩大類。光學(xué)顯微鏡又可分為單式顯微鏡和復(fù)式顯微鏡。簡單的單式顯微鏡即放大鏡（放大倍數(shù)常在10倍左右），構(gòu)造復(fù)雜的單式顯微鏡為解剖顯微鏡（放大倍數(shù)在200左右）。在微生物學(xué)的研究中，主要是復(fù)式顯微鏡。其中以普通光學(xué)顯微鏡（明視野顯微鏡）常用。此外，還有暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡、偏光顯微鏡、紫外光顯微鏡和倒置顯微鏡等。非光學(xué)顯微鏡為電子顯微鏡。





（七）冰箱
微生物實驗室的冰箱主要有兩種：普通冰箱和低溫冷凍冰箱。普通冰箱一般都具有兩個柜子，即鮮藏柜和冷藏柜，溫度分別為4℃和－20℃；低溫冷凍冰箱溫度一般控制在－40～－80℃。它們都可以用于微生物菌種保藏。鮮藏柜常用于保存斜面菌種，保藏時間在3個月左右。超過3個月，斜面就會變干，因此需要轉(zhuǎn)接菌種。如果要長時間保存菌種，則需要經(jīng)過處理后，貯藏于普通冰箱的冷藏柜或低溫冷凍冰箱中，它們的保藏時間較長，一般都在1年以上。



（八）接種箱（Clean Box）

接種箱分為固體菌種接種箱和液體菌種接種箱兩種。固體菌種接種箱是一個用木料和玻璃制成或由有機玻璃焊接而成的密閉小箱。又分為雙人和單人操作箱。箱體可大可小，一般箱體長約143cm，寬86cm，總高154cm，支架76cm。箱的上部左右兩側(cè)各裝有兩扇能啟閉的玻璃推拉門，方便菌種進出。窗的下部分別設(shè)有兩個直徑約13cm的圓洞，兩洞的中心距離為52cm（同肩寬），洞口裝有帶松緊帶的袖套，以防雙手在箱內(nèi)操作時，外界空氣進入箱內(nèi)造成污染。操作時兩人相對而坐，雙手通過袖套伸入箱內(nèi)。箱兩側(cè)也裝上玻璃，箱頂部為木板或玻璃。箱內(nèi)頂部裝有紫外線殺菌燈和照明用日光燈各一支。箱體安裝木板或玻璃均可，但要注意密封。

液體菌種接種箱是專為移接液體菌種而設(shè)計的。比固體菌種箱窄長，單側(cè)兩人操作。內(nèi)設(shè)軌道和紫外線燈，箱兩端開有高25cm，寬10cm的長方形出口，方便菌種進出，洞口設(shè)有小推門。進出口下處設(shè)蒸汽源，接種時用蒸汽封住進出口，以防雜菌進入箱內(nèi)。箱背面設(shè)有液體菌種移接管能進入的小孔。

接種箱滅菌時，用紫外線照射30min。如果沒有紫外線燈，可用甲醛和高錳酸鉀（甲醛10～14mL/m3+高錳酸鉀5～7g/m3空間）熏蒸30min以上。使用時，先將所需物品和工具放入接種箱內(nèi)，然后進行藥劑熏蒸和紫外線滅菌，再按無菌操作進行接種。接種箱的結(jié)構(gòu)簡單，造價低廉，易消毒滅菌，操作方便，而且人在箱外操作，氣溫較高時也能作業(yè)。缺點是進出培養(yǎng)基費工費時，每次接種前都需要進行滅菌。