微生物實(shí)驗(yàn)室都需要些什么

（一）高壓蒸汽滅菌鍋（High-PressureSteam Sterilization Pot）

高壓蒸汽滅菌鍋是一個(gè)密閉的、可以耐受一定壓力的雙層金屬鍋。鍋底或夾層內(nèi)盛水，當(dāng)水在鍋內(nèi)沸騰時(shí)由于蒸汽不能逸出，使鍋內(nèi)壓力逐漸升高，水的沸點(diǎn)和溫度可隨之升高，從而達(dá)到高溫滅菌的目的。一般在0.11MPa的壓力下，121℃滅菌20~30min，包括芽孢在內(nèi)的所有微生物均可被殺死。如果滅菌物品體積較大，蒸汽穿透困難，可以適當(dāng)提高蒸汽壓力或延長(zhǎng)滅菌時(shí)間。

高壓滅菌鍋有臥式、立式、手提式等多種類(lèi)型，在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，常用的是手提式和立式高壓蒸汽滅菌鍋。和常壓滅菌鍋相比，高壓滅菌鍋的優(yōu)點(diǎn)是滅菌所需的時(shí)間短、節(jié)約燃料、滅菌*等。其缺點(diǎn)是價(jià)格昂貴，滅菌容量較小。




（二）凈化工作臺(tái)(Clean Bench)

凈化工作臺(tái)是一種局部層流裝置，能在局部形成高潔度的工作環(huán)境。它由工作臺(tái)、過(guò)濾器、風(fēng)機(jī)、靜壓箱和支撐體等組成，采用過(guò)濾空氣使工作臺(tái)操作區(qū)達(dá)到凈化除菌的目的。室內(nèi)空氣經(jīng)預(yù)過(guò)濾器和高效過(guò)濾除塵后以垂直或水平層流狀態(tài)通過(guò)工作臺(tái)的操作區(qū)，由于空氣沒(méi)有渦流，所以，任何一點(diǎn)灰塵或附著在灰塵上的雜菌都能被排除，不易向別處擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。因此，可使操作區(qū)保持無(wú)菌狀態(tài)。

與無(wú)菌室和接種箱比較，使用凈化工作臺(tái)具有工作條件好、操作方便、無(wú)菌效果可靠、無(wú)消毒-藥劑對(duì)人體危害、占用面積小且可移動(dòng)等優(yōu)點(diǎn)。如果放在無(wú)菌室內(nèi)使用，無(wú)菌效果更好。其缺點(diǎn)是價(jià)格昂貴，預(yù)過(guò)濾器和高效過(guò)濾器還需要定期清洗和更換。






（三）培養(yǎng)箱（CultureBox）

培養(yǎng)箱是培養(yǎng)微生物的設(shè)備。制熱式培養(yǎng)箱是由電爐絲和溫度控制儀合成的固定體積的恒溫培養(yǎng)裝置，大小規(guī)格不一。微生物實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)箱工作容積有450×450×350mm3或650×500×500mm3，適用于室溫至60℃之間的各類(lèi)微生物培養(yǎng)。目前，隨著科學(xué)水平的發(fā)展，培養(yǎng)箱設(shè)備的完善程度和價(jià)格有很大差別。有各種結(jié)構(gòu)合理、功能齊全的培養(yǎng)箱，如恒溫培養(yǎng)箱、恒溫恒濕培養(yǎng)箱、低溫培養(yǎng)箱、微生物多用培養(yǎng)箱和二氧化碳培養(yǎng)箱等。有的用計(jì)算機(jī)控制，可選擇多條時(shí)間線變換溫差，從而克服了環(huán)境溫度的影響，一年四季均能達(dá)到培養(yǎng)要求的溫度。





（四）干燥箱（Drying Box）

干燥箱是用于除去潮濕物料內(nèi)及器皿內(nèi)外水分或其它揮發(fā)性溶液的設(shè)備。類(lèi)型很多，有箱式、滾筒式、套間式、回轉(zhuǎn)式等。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室多用箱式干燥箱，大小規(guī)格不一。工作室內(nèi)配有可活動(dòng)的鐵絲網(wǎng)板，便于放置被干燥的物品。制熱升溫式干燥箱也是有電爐絲和溫度控制儀組成，可調(diào)節(jié)溫度從室溫至300℃任意選擇。有的干燥箱采用導(dǎo)電溫度計(jì)為敏感元件，配合晶體管和繼電器組成自動(dòng)控制系統(tǒng)，克服了金屬管型熱膨脹控制的缺點(diǎn)。此外，還有真空干燥箱(配有真空泵和氣壓表)，可在常壓或減壓下操作。





（五）搖床（Shaking Bed）

搖床又稱(chēng)搖瓶機(jī)，它是培養(yǎng)好氣性微生物的小型試驗(yàn)設(shè)備或作為種子擴(kuò)大培養(yǎng)之用，常用的搖床有往復(fù)式和旋轉(zhuǎn)式兩種。往復(fù)式搖床的往復(fù)頻率一般在80~140次/min，沖程一般為5~14cm，如頻率過(guò)快、沖程過(guò)大或瓶?jī)?nèi)液體裝量過(guò)多，在搖動(dòng)時(shí)液體會(huì)濺到包扎瓶口的紗布或棉塞上，導(dǎo)致雜菌污染，特別是啟動(dòng)時(shí)更容易發(fā)生這種情況。旋轉(zhuǎn)式搖床的偏心距一般在3~6cm之間，旋轉(zhuǎn)次數(shù)為60~300rpm。

放在搖床上的培養(yǎng)瓶（一般為三角瓶）中的發(fā)酵液所需要的氧是由空氣經(jīng)瓶口包扎的紗布(一般8層)或棉塞通入的，所以氧的傳遞與瓶口的大小、瓶口的幾何形狀、棉塞或紗布的厚度和密度有關(guān)。在通常情況下，搖瓶的氧吸收系數(shù)取決于搖床的特性和三角瓶的裝樣量。

往復(fù)式搖床是利用曲柄原理帶動(dòng)搖床作往復(fù)運(yùn)動(dòng)，機(jī)身為鐵制或木制的長(zhǎng)方框子，有一層至三層托盤(pán)，托盤(pán)上有圓孔備放培養(yǎng)瓶，孔中凸出一個(gè)三角形橡皮，用以固定培養(yǎng)瓶并減少瓶的振動(dòng)，傳動(dòng)機(jī)構(gòu)一般采用二級(jí)皮帶輪減速，調(diào)換調(diào)速皮帶輪可改變往復(fù)頻率。偏心輪上開(kāi)有不同的偏心孔，以便調(diào)節(jié)偏心距。往復(fù)式搖床的頻率和偏心距的大小對(duì)氧的吸收有明顯的影響。

旋轉(zhuǎn)式搖床是利用旋轉(zhuǎn)的偏心軸使托盤(pán)擺動(dòng)，托盤(pán)有一層或兩層，可用不銹鋼板、鋁板或木制板制造。在三個(gè)偏心軸上裝有螺栓可調(diào)節(jié)上下，使托盤(pán)保持水平。這種搖床結(jié)構(gòu)復(fù)雜，造價(jià)高。其優(yōu)點(diǎn)是氧的傳遞較好、功率消耗小、培養(yǎng)基不會(huì)濺到瓶口的紗布上。





（六）顯微鏡（Microscope）

微生物個(gè)體微小，必須借助顯微鏡才能觀察清楚它們的個(gè)體形態(tài)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)。因此，在微生物學(xué)的各項(xiàng)研究中，顯微鏡就成為*的工具。

顯微鏡的種類(lèi)很多，根據(jù)其結(jié)構(gòu)，可以分為光學(xué)顯微鏡和非光學(xué)顯微鏡兩大類(lèi)。光學(xué)顯微鏡又可分為單式顯微鏡和復(fù)式顯微鏡。簡(jiǎn)單的單式顯微鏡即放大鏡（放大倍數(shù)常在10倍左右），構(gòu)造復(fù)雜的單式顯微鏡為解剖顯微鏡（放大倍數(shù)在200左右）。在微生物學(xué)的研究中，主要是復(fù)式顯微鏡。其中以普通光學(xué)顯微鏡（明視野顯微鏡）常用。此外，還有暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡、偏光顯微鏡、紫外光顯微鏡和倒置顯微鏡等。非光學(xué)顯微鏡為電子顯微鏡。





（七）冰箱
微生物實(shí)驗(yàn)室的冰箱主要有兩種：普通冰箱和低溫冷凍冰箱。普通冰箱一般都具有兩個(gè)柜子，即鮮藏柜和冷藏柜，溫度分別為4℃和－20℃；低溫冷凍冰箱溫度一般控制在－40～－80℃。它們都可以用于微生物菌種保藏。鮮藏柜常用于保存斜面菌種，保藏時(shí)間在3個(gè)月左右。超過(guò)3個(gè)月，斜面就會(huì)變干，因此需要轉(zhuǎn)接菌種。如果要長(zhǎng)時(shí)間保存菌種，則需要經(jīng)過(guò)處理后，貯藏于普通冰箱的冷藏柜或低溫冷凍冰箱中，它們的保藏時(shí)間較長(zhǎng)，一般都在1年以上。



（八）接種箱（Clean Box）

接種箱分為固體菌種接種箱和液體菌種接種箱兩種。固體菌種接種箱是一個(gè)用木料和玻璃制成或由有機(jī)玻璃焊接而成的密閉小箱。又分為雙人和單人操作箱。箱體可大可小，一般箱體長(zhǎng)約143cm，寬86cm，總高154cm，支架76cm。箱的上部左右兩側(cè)各裝有兩扇能啟閉的玻璃推拉門(mén)，方便菌種進(jìn)出。窗的下部分別設(shè)有兩個(gè)直徑約13cm的圓洞，兩洞的中心距離為52cm（同肩寬），洞口裝有帶松緊帶的袖套，以防雙手在箱內(nèi)操作時(shí)，外界空氣進(jìn)入箱內(nèi)造成污染。操作時(shí)兩人相對(duì)而坐，雙手通過(guò)袖套伸入箱內(nèi)。箱兩側(cè)也裝上玻璃，箱頂部為木板或玻璃。箱內(nèi)頂部裝有紫外線殺菌燈和照明用日光燈各一支。箱體安裝木板或玻璃均可，但要注意密封。

液體菌種接種箱是專(zhuān)為移接液體菌種而設(shè)計(jì)的。比固體菌種箱窄長(zhǎng)，單側(cè)兩人操作。內(nèi)設(shè)軌道和紫外線燈，箱兩端開(kāi)有高25cm，寬10cm的長(zhǎng)方形出口，方便菌種進(jìn)出，洞口設(shè)有小推門(mén)。進(jìn)出口下處設(shè)蒸汽源，接種時(shí)用蒸汽封住進(jìn)出口，以防雜菌進(jìn)入箱內(nèi)。箱背面設(shè)有液體菌種移接管能進(jìn)入的小孔。

接種箱滅菌時(shí)，用紫外線照射30min。如果沒(méi)有紫外線燈，可用甲醛和高錳酸鉀（甲醛10～14mL/m3+高錳酸鉀5～7g/m3空間）熏蒸30min以上。使用時(shí)，先將所需物品和工具放入接種箱內(nèi)，然后進(jìn)行藥劑熏蒸和紫外線滅菌，再按無(wú)菌操作進(jìn)行接種。接種箱的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，造價(jià)低廉，易消毒滅菌，操作方便，而且人在箱外操作，氣溫較高時(shí)也能作業(yè)。缺點(diǎn)是進(jìn)出培養(yǎng)基費(fèi)工費(fèi)時(shí)，每次接種前都需要進(jìn)行滅菌。